标签的发射光谱应与所应用的过滤器组。反过来,滤波器组的选择必须使其能够阻挡激发光被样品散射但尽可能有效地透射荧光!例如,当使用波长为635nm的二极管激光器作为激励源时ATTO647N的滤光片组具有650nm和750nm之间的高透射率是一个非常好的选择!从该目录中的ATTO标签列表中可以看出,ATTO647N在635nm处具有高消光系数,该波长接近吸收曲线的大值,以及优异的荧光量zi产率(hfl=65%)!
需要280nm和260nm波长处的CF值来确定抗体等生物分子的标记程度(DOL),并用于校正染料偶联物中相应荧光染料的吸收分数!在蛋白质标记的情况下,校正因子CF280用于寡核苷酸CF的标记260。如何选择正确的标签为了获得尽可能好的结果,必须考虑几个因素。首先是激发源:为了减少样品自发荧光引起的干扰优选550nm以上或者甚至600nm以上的激发波长。除了减少红色光谱区域在与活细胞一起工作时也是有利的,因为减少了损坏.
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ATTO-TECGmbH成立于1999年秋季,是锡根大学的衍生公司。这里的决定性因素是四位创始人在有机激光和荧光染料方面数十年的科学经验.在1990年代,Drexhage教授的研究团队专注于合成和开发用于标记生物分子的长波荧光团,因为基于荧光的技术在新兴的生命科学领域确立了自己的灵敏检测和分析方法.因此,这家仍然年轻的公司能够在2000年夏天在美因河畔法兰克福的ACHEMA上展示自己的市场就绪产品,作为医学,诊断和生物学荧光染料的制造商.
正宗atto-tec
该链路已在许多应用中得到证明!但是,如果您的应用需要不同的链接器长度,如果您希望链接刚性或具有其他特殊属性,请告诉我们!官能团和偶联物:NHS酯和马来酰亚胺是分别用于将染料偶联到氨基和硫醇基团的常用官能团!然而,具有其他官能团的底物需要具有完全不同的反应基团的标记!因此,ATTO-TEC提供具有氨基,酰肼基团和生物素的染料标记物,用于与生物分子偶联!此外,叠氮化物和炔烃可用于“点击化学”等等!这些衍生物通常列在所需的染料下.
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如果在那里找不到特定的染料衍生物,通常可以为您生产。荧光分子发出的光,即所谓的荧光,已经为人们所知超过一百六十年。由于多功能光源的发展(激光等)和准确的探测器,荧光光谱已经成为一种强大的具有高灵敏度的工具!如今,即使是单个分子也可以通过新颖、复杂的荧光技术!这种方法的巨大潜力在于2014年因发明超分辨荧光显微镜而获得诺贝尔化学奖.大多数感兴趣的分子,例如在生物化学中,不显示其荧光拥有然而,它们可以用荧光染料进行化学连接,即标记!
下表概述了一些常用的激励源和推荐的ATTO标签!如今,紧凑而强大的激光二极管正在覆盖整个可见光和近红外区域光谱的红外部分。他们进入了许多应用程序/设备非常有效的激发源和越来越多的替代经典光源.如果没有与波长完全匹配的吸收大值的标签对于激发源,应选择波长稍长的标签.这个吸光度会更小,但激发波长和荧光光谱始终与激发波长无关,具有具有更好地辨别散射激发光的优点。ATTO染料标记的磷脂生物膜如质膜、细胞内膜,还有人造脂质膜在研究和科学中都非常感兴趣。
然而,对于大多数ATTO染料来说,这种影响非常小.此外,荧光染料的光学性质取决于衍生物(羧基,NHS酯等)!例如,与染料酸(羧基)相比,染料马来酰亚胺的荧光量zi产率和荧光寿命显着降低!然而,这并不重要,因为在染料马来酰亚胺与生物分子(例如蛋白质)偶联后,荧光会恢复!该表包含常用的衍生物的分子量(MW),分别用于偶联氨基和硫醇基团的NHS酯和马来酰亚胺。分子量包括反离子!为了协助生物分子-染料偶联物的MS分析,还给出了偶联后每种ATTO染料的相应质量和电荷增加!