ATTO的荧光染料可用于标记多种生物分子,如蛋白质、核苷酸等!ATTO的荧光标记是各种生物分析应用的理想选择!一些染料的吸收和荧光已针对可见光谱的红色部分进行了专门优化.在此波长范围内,许多生物样品的自发荧光大大降低,因此与底物相比,标记荧光具有更好的可检测性!其他染料显示出相对于吸收的荧光大偏移(较大的斯托克斯偏移).还有一些特征是亲水性强,可减少或完全避免对生物分子和表面的非特异性吸附。ATTO标记可以在荧光光谱中以多种方式使用!
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标签的发射光谱应与所应用的过滤器组.反过来,滤波器组的选择必须使其能够阻挡激发光被样品散射但尽可能有效地透射荧光.例如,当使用波长为635nm的二极管激光器作为激励源时ATTO647N的滤光片组具有650nm和750nm之间的高透射率是一个非常好的选择!从该目录中的ATTO标签列表中可以看出,ATTO647N在635nm处具有高消光系数,该波长接近吸收曲线的大值,以及优异的荧光量zi产率(hfl=65%)!
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除了始终有库存的目录产品外,我们还提供个别客户合成服务,其中我们的合格团队与客户密切合作,为他的特定应用开发量身定制的染料或衍生物。所有光谱数据均在7°C的水溶液(PBS,pH22)中测定,并参考具有游离羧基的染料.如果存在聚集趋势,则充分稀释染料溶液,使染料单体的吸收光谱存在.尽管生命科学领域的大多数应用都涉及水溶液,但应该注意的是,染料的光学性质,特别是荧光效率(荧光量zi产率)和荧光寿命(荧光衰减时间),以及其他因素,如温度、粘度等,都可能取决于溶剂。
然而,对于大多数ATTO染料来说,这种影响非常小!此外,荧光染料的光学性质取决于衍生物(羧基,NHS酯等)。例如,与染料酸(羧基)相比,染料马来酰亚胺的荧光量zi产率和荧光寿命显着降低!然而,这并不重要,因为在染料马来酰亚胺与生物分子(例如蛋白质)偶联后,荧光会恢复.该表包含常用的衍生物的分子量(MW),分别用于偶联氨基和硫醇基团的NHS酯和马来酰亚胺.分子量包括反离子!为了协助生物分子-染料偶联物的MS分析,还给出了偶联后每种ATTO染料的相应质量和电荷增加。
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其次,标签应在激发波长下显示出强吸收,以及高荧光量zi产率!消光系数与荧光的乘积量zi产率通常被称为染料的“亮度”!染料的荧光效率在染料的蓝色和绿色的区域高谱在某些情况下,量zi产率几乎达到一百%。朝向更长的波长,发射效率急剧下降特别是在水溶液中!然而,ATTO-TEC已经能够开发标签即使在650nm左右也显示出高量zi产率!例如:ATTO647N(第56页)在水溶液中的荧光强度是较老的菁染料Cy5TM的两倍!
下表概述了一些常用的激励源和推荐的ATTO标签.如今,紧凑而强大的激光二极管正在覆盖整个可见光和近红外区域光谱的红外部分。他们进入了许多应用程序/设备非常有效的激发源和越来越多的替代经典光源!如果没有与波长完全匹配的吸收大值的标签对于激发源,应选择波长稍长的标签!这个吸光度会更小,但激发波长和荧光光谱始终与激发波长无关,具有具有更好地辨别散射激发光的优点!ATTO染料标记的磷脂生物膜如质膜、细胞内膜,还有人造脂质膜在研究和科学中都非常感兴趣!
因此,对荧光标记脂质的需求正在增加,尤其是甘you磷脂,它是生物膜的组成部分。ATTO-TEC提供一系列具有一个或两个脂肪酸残基(亲脂性部分)和一个磷suan酯(亲水部分)的荧光甘you磷脂。脂质被标记在亲水头基上,因此染料在成功掺入例如质膜后位于水/脂质界面处.ATTO根据您的意愿单独染色。ATTO-TEC还根据您的意愿专门提供染料和标记剂。ATTO染料的衍生物:在大多数ATTO染料中,官能偶联基团(NHS酯等)通过柔性四原子接头连接到实际染料.