storm™工具包RNAstorm™萃取试剂盒包括化学催化剂,包括在烷基化和交联的碱基上。这专有的CAT5™技术被证明可以导致RNA具有更高的质量和产量,更好的完整性,该试剂盒提供了所有必要的试剂来提取总试剂来自FFPE组织样本的RNA遵循用户友好的亲亲可以在1小时内完成准时!在使用切片机进行切片后,该组织首先使用无二甲苯溶液进行脱亲和.然后,用CAT5™试剂处理组织并进行裂解,使用蛋白酶溶液。与旋转柱结合后洗涤后,RNA用DNaseI处理以去除con-污染基因组DNA.
所需材料:·1RNAstorm™试剂盒(CD201或CD501)·1DNAstorm™试剂盒(CD202或CD502)首先根据RNAstorm™试剂盒协议提取样本,并进行以下修改:a)在72˚C下执行步骤3(通常为2小时孵育)30分钟.有关此步骤的可能优化,请参见注意事项。b)按照指示执行RNAstorm™协议的步骤4和步骤5,但在步骤5中不要丢弃颗粒!c)按照步骤6中的指示,将上清液转移到一个新的试管中.
celldata试剂盒
NGS的好选择NGS文库制备依赖于多个酶促步骤,包括反转录和扩增,这需要具有高完整性和扩增性的核酸。RNAstorm™试剂盒提供了专为下游应用量身定制的样品处理解决方案,使用户能够可靠地处理具有挑战性但有价值的福尔马林固定样品!便捷的工作流程CellDataSciences核酸提取试剂盒为纯化高质量RNA和DNA提供了便捷的方案。公司产品RNAstorm™FFPE:PowerfulRNAextractionfromFFPEsamplesDNAstorm™FFPE:HighqualityandefficientFFPEDNAextractionRNAstorm™FreshCellsandTissue:SimpleextractionofhighqualityRNA其RNAstorm™试剂盒,用于从福尔马林固定的RNA中提取(FFPE)组织样本!
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这表明RNA的完整性、化学修饰和交联的程度对这里测试的样品起着重要作用,通常在FFPE样品的qPCR性能中起重要作用!使用RNAstorm™试剂盒观察到RNA完整性的增加使用毛细管电泳也观察到RNA完整性的增加!样品使用RNA进行处理安捷伦2100生物分析仪上的6000纳米总RNA试剂盒,数据使用安捷伦专家软件进行分析。结论据估计,目前全球生物样本库中存在数亿份患者FFPE样本,每年还会产生数百万份患者FFPE样本!
几种类型的正常和肿瘤FFPE标本!古老的样本是在1976年确定的,新的样本是在2015年。采用定量RT-PCR方法对可扩增的RNA进行相对定量!Ct值重复测量三次。使用一个高表达基因(TPT1)的83bp扩增子,并分析熔体曲线以确保特异性扩增!RNAstorm™试剂盒大幅增加了可扩增RNA的产量,虽然Qubit测量的RNA浓度通常也更高(数据未显示),但仅这些浓度差异并不足以解释RNAStorm™试剂盒和KitQ之间Ct值的巨大差异.
对于长期储存,建议将蛋白酶K和RN酶A储存在2-8˚C处.在您开始前请确保您准备好以下未提供的用品和设备:用于组织切片的微体!如果不使用附带的脱蜡试剂,应提前准备一种替代的脱蜡溶液.木甲烯)。乙醇(200级,分子生物学级)!热块设置为56˚C和80˚C.一个充满冰的容器.5mL微离心管(推荐使用DNA/RNALoBind)。微离心机(小12000立英尺)!洗涤缓冲液:确保200型乙醇加入20mL(50反应包).