常见问题分析
一、纯化后样品纯度不高怎么办?
1. 若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大,目标蛋白通过穿透步骤获得,通过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;
若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小,上海宸乔生物科技有限公司,上海宸乔生物科技,目标蛋白通过洗脱步骤获得,正规核酸分离纯化柱报价,效果好,过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;再调节洗脱溶液的离子强度和 pH,使目标蛋白与杂蛋白逐渐分离;
选择合适的离子交换填料及粒径;
柱没有经过起始缓冲液的充分平衡;
降低洗脱流速;
调整样品溶液黏度具体凝胶过滤色谱介质应用
如下:常用凝胶过滤色谱介质的分离范围凝胶介质蛋 白 质 的 分 离 范 围凝胶介质蛋 白 质 的 分 离 范 围Sephadex G251~5Sepharose 2B70~40000Sephadex G501.5~30Bio-Gel P-40.5~4Sephadex G1004~150Bio-Gel P-105~17Sephadex G2005~600Bio-Gel P-6030~70Sepharose 6B10~4000Bio-Gel P-15050~150Sepharose 4B60~20000Bio-Gel P-300100~400
2. 凝胶介质的预处理
凝胶在使用前应用水充分溶胀(胶:水=1:10),正规核酸分离纯化柱报价,知名生产厂家,自然溶胀的耗时较长,正规核酸分离纯化柱报价,哪里有销售,可采用加热的方法使溶胀加速,即在沸
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水浴中将凝胶升温至沸,1~2h即可达到溶胀
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