培养基

细胞培养概述什么是细胞培养？细胞培养是一种实验室技术，用于生长和繁殖细胞。这个过程通常在培养皿或生物反应器中进行，提供细胞所需的适当环境条件，如温度、营养物质和气体。细胞培养可用于研究细胞的生物学特性、生长、分化、药物测试以及生物工程应用，是科学研究和工业生产的重要工具。细胞有哪些种类，各有什么特性？按生长习惯可分为三类：悬浮细胞、贴壁细胞和半贴壁细胞。悬浮细胞（SuspensionCells）：特性：悬浮细胞是在液体培养基中自由悬浮的细胞，它们不附着于培养皿表面。这些细胞通常较小，形状不规则，可以在培养基中轻松混合和分散。示例：Farage、Jurkat等。贴壁细胞（AdherentCells）：特性：贴壁细胞附着于培养皿表面，通常形成单层或多层细胞群。它们需要培养皿的表面提供附着点，通常会形成可观察的细胞单层。示例：A549、HepG2等。半贴壁细胞（Semi-AdherentCells）：特性：半贴壁细胞既可以在液体培养基中悬浮，又可以附着于培养皿表面。它们通常在培养基中的一部分细胞悬浮，一部分细胞附着。示例：BV2、B95-8等。细胞特性决定生长条件，生长状态提示细胞活性悬浮细胞：悬浮细胞悬浮生长，有条件的老师可使用旋转培养器，确保细胞均匀分散。沉底的细胞往往状态不佳。液体培养基中相对空间大，细胞生长速度相对较快，悬浮细胞通常需要较高浓度的营养物质，常添加额外营养成分如谷氨酰胺代替物GlutaMax。贴壁细胞：生长条件：贴壁细胞需要培养皿表面提供附着点。常见的培养皿包括细胞培养皿、培养瓶或多孔膜。漂浮的细胞往往已死亡。贴壁细胞生长速度相对较慢，且依赖于培养皿表面的支持。半贴壁细胞：生长条件：半贴壁细胞可以悬浮生长，也可以附着于培养皿表面。相对灵活。需要通过细胞形态或染色判断细胞死活。半贴壁细胞的营养需求可以根据其生长状态而变化，以适应不同的培养条件。常见培养基类型及适配细胞DMEM（Dulbecco"sModifiedEagleMedium）DMEM是由美国科学家Eagle于1959年改良的，多用于上皮细胞，神经元、胶质细胞、平滑肌细胞。成分：DMEM包括基础培养基，如高糖量的DMEM和低糖量的DMEM。DMEM包含的主要成分包括高浓度的葡萄糖、氨基酸、维生素、盐类、L-谷氨酰胺和胰酶抑制剂。适用范围广。MEM（MinimumEssentialMedium）MEM早由Eagle于1959年开发。可用于成纤维细胞和原代大鼠星形胶质细胞等。成分：MEM为低基本培养基。MEM可以具有不同的变种，如Eagle"sMEM和Earle"sMEM，它们在成分和用途上略有不同。RPMI-1640（RoswellParkMemorialInstituteMedium1640）RPMI-1640是由Moore等人1966年开发的，多用于淋巴细胞和肿瘤细胞的培养。成分：RPMI-1640是一种富含氨基酸、维生素和微量元素的培养基。F12（Ham"sF-12NutrientMixture）F12培养基是由Ham于1965年开发的。多用于MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞。成分：F12包括氨基酸、葡萄糖、核酸、维生素和盐类。另有是DMEM和F12的1:1混合物的DMEM/F-12培养基。如何选择合适的培养基？选择适当的细胞培养基是细胞培养中非常重要的步骤，它会影响细胞的生长速率、状态和实验结果。1.参考文献和厂家建议：查阅ATCC（AmericanTypeCultureCollection）或相关文献，了解以前研究同一或相似细胞系的人所使用的培养基和条件。细胞及细胞培养物厂商提供的说明都是有用的参考资料。2.根据细胞类型和实验需求：常规来说，培养基均需要添加10-15%血清（一般为胎牛血清）以提供蛋白，部分生长因子，维生素及其他辅助物质。以促进细胞生长、维持表型。非无菌室的细胞房应常规添加抗生素。某些细胞可能需要特殊培养条件，以满足其特殊的要求。如原代B细胞需要添加LPS以激活，神经细胞培养常需添加B-27等。也可基于实验改变培养条件，如转染细胞或细胞同步化时常使用减血清培养基opti-MEM。3.进行试验性培养：采用此类培养或更换培养条件时（如换血清），建议进行试验性培养，以确定所选培养组分是否适用于您的细胞。细胞培养进阶--原代细胞系培养是细胞培养中常规的环节，而细胞从来源又可分为细胞系和原代细胞。从培养系统又可分为常规培养及3D/基质培养系统。不同组织来源细胞所需培养体系差别较大。细胞培养试剂0103Trypsin/EDTA胰酶消化液Trypsin/EDTA，0.25%0143CFM-sfCellFreezingMedium-Serum-Free无血清细胞冻存液0863HEPHeparin肝素

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